Immunoelektroforees

Immunoelektroforees kasutatakse monoklonaalsete antikehade laboratoorseks diagnostiliseks tuvastamiseks patsiendi veres. Monoklonaalsed antikehad on saadud samast rakust ja on suunatud samade antigeenide vastu. Sel põhjusel tuleb neid pidada patoloogilisteks ja kui need on tõestatud, põhjustavad nad selliseid haigusi nagu Waldenströmi tõbi.

Mis on immunoelektroforees?

Ioonidel on erinev liikuvus. See erinev liikuvus on elektrofreesiprotseduuri alus. Need meetodid eraldavad erinevad ained üksteisest, kasutades elektrivälju ja gravitatsiooni. Valdkonnas hästi tuntud meetod on immunoelektroforees.

See on kvalitatiivne diagnostiline meetod, mida kasutatakse monoklonaalsete antikehade tuvastamiseks. Antikehad on immunoloogiliselt aktiivsed valguained, mis pärinevad konkreetsest rakuliinist. Kõik monoklonaalsed antikehad põhinevad samadel B-lümfotsüütidel ja on seetõttu suunatud ühe epitoobi vastu. Iga loomulik immuunvastus sissetungijate antigeenidele vastab polüklonaalsele vastusele ja on seetõttu suunatud erinevate epitoopide vastu. Seetõttu annab monoklonaalne immuunvastus viiteid keha patoloogilistele protsessidele.

Monoklonaalsed antikehad seovad erinevaid molekule suure spetsiifilisusega. Seda seondumist saab näidata immunoelektroforeesi abil. Protseduur on laboratoorses diagnostikas kvalitatiivne protseduur ja koosneb kahte tüüpi protseduuridest: seerumi elektroforees ja immunodifusioon.

Funktsioon, mõju ja eesmärgid

Immunoelektroforees ühendab seerumi elektroforeesi metoodika immunodifusiooniga. Patsiendi seerum asetatakse agaroosgeelile või tselluloosatsetaatkilele. Samuti rakendatakse kontrollseerumit. Taotlusele järgneb proovide elektroforeetiline eraldamine. Jaotusjoonte vahele kantakse antiseerumid, IgG, IgA, IgM, normaalse elektroforeesi jaoks äädikhape ning kappa ja lambda.

See tekitab reaktsiooni patsiendi seerumis olevate antikehadega, mis loob sadenemisjooni. Sõltuvalt kasutatavast antiseerumist ja üksikute joonte asukohast ja kujust saab teha järeldusi immuunglobuliinide kohta, mis sisalduvad kerge ahelaga kappa või lambda. Lambda riba korral on antikehadest koosnevad vabad kerged ahelad. Labor pakub täiendavaid tõendeid haruldaste IgE ja IgD kaudu, mis võimaldab immunoglobuliinide täpset määramist. Immunodifusiooni elektroforeesi meetod toimub vastavalt Pierre Grabarile ja Curtis Williamsile ning see vastab valkude agaroosgeeli elektroforeesi ja antikehade difusiooni kombinatsioonile.

Kõigepealt toimub agaroosgeeli elektroforees. Seejärel difundeeruvad sisalduvad antikehad antigeenide ribade vastu ja loovad seeläbi sademekaare. Seda tuleb eristada raketi immunoelektroforeesist Laurelli järgi, mis vastab agaroosgeeli kuuluvate valkude elektroforeesile, millest kõigil on teatud kontsentratsiooniga antikehad. Geelis on kergelt aluseline puhver, mis võimaldab ainult antigeenidel rännata ja mis sunnib kergelt aluselise pH väärtusega kokkupuutel enamiku antikehi isoelektrilisse punkti jõudma, kuni need lakkavad elektroforeetiliselt liikumast.

Raketi immunoelektroforeesi alguses on antigeeni ülejääk, nii et moodustuvad lahustuvad antigeeni-antikeha kompleksid. Elektroforeesi ajal toimub seondumine ka antigeenide ja teiste antikehade vahel. Sel viisil moodustuvad ekvivalentsuspunktis immunosadestajad, mis sarnanevad raketilaadsetele arvudele, mille kõrgus on proportsionaalne antigeeni kontsentratsiooniga. Katse hindamiseks mõõdetakse sademe kõrgus.

Ravimid leiate siit

Riskid, kõrvaltoimed ja ohud

Monoklonaalsete antikehade tuvastamine on hulgimüeloomi ja Waldenströmi tõve diagnoosimisel eriti oluline. Esitatud tõendid räägivad immuunrakkude pahaloomulisest degeneratsioonist. Hulgimüeloom vastab luuüdi vähile, mida iseloomustab antikehi tootvate rakkude pahaloomuline paljunemine plasmas.

Need plasmarakud toodavad antikehi ja nende fragmente. Pahaloomulised plasmarakud pärinevad alati ühisest eellasrakust ja on seetõttu geneetiliselt identsed. Nad toodavad ainult monoklonaalseid antikehi. Selle haiguse pahaloomuline kasvaja võib vastata vähieelsele staadiumile, kuid see võib ulatuda ka väga pahaloomulisse staadiumisse, mis ilma ravita on kiiresti surmaga lõppev. Haiguse sümptomid tulenevad rakkude pahaloomulisest kasvust või antikehadest ja antikehade fragmentidest. Kõige tavalisemad sümptomid on luuvalu, luu lahustumine ja spontaansed luumurrud.

Kaltsiumisisaldus veres on sageli suurenenud. Lisaks ladestuvad ebanormaalsed antikehad sageli koesse ja põhjustavad elundites funktsionaalseid häireid, mis võivad põhjustada selliseid sümptomeid nagu neerupuudulikkus või halvenenud verevool. Waldströmi tõbi on ka pahaloomuline kasvajahaigus. Täpsemalt on tegemist pahaloomulise lümfoomihaigusega, mis arvatakse aeglaselt progresseeruvate ja peaaegu asümptomaatilise B-raku mitte-Hodgkini lümfoomide hulka. Enamikul juhtudel võib haiguses tuvastada pahaloomuliste lümfoomirakkude aktiivsusest tingitud monoklonaalse IgM ebanormaalset tootmist.

Waldenströmi haigus on oma omaduste poolest äärmiselt sarnane hulgimüeloomiga, kuid näitab tavaliselt soodsamat kulgu. Enamik Waldenströmi tõvega patsiente on diagnoosimise ajaks suures osas asümptomaatilised. Teistel patsientidel ilmnevad varakult sellised sümptomid nagu mittespetsiifiline väsimus või perifeersed neuropaatiad, mis on põhjustatud monoklonaalse IgM ladestumisest müeliini ümbrisesse. Isegi väikesed IgM kogused võivad vallandada polüneuropaatia. Polüneuropaatiat ei esine teistel patsientidel, isegi kõrgel tasemel. Lisaks võivad ilmneda mittespetsiifilised sümptomid nagu palavik, soovimatu kaalulangus või öine higistamine. Samuti on iseloomulik luuvalu.

IgM ületootmise tõttu muutub veri hüperviskoosseks, nii et mainitud sümptomeid saab seostada hüperviskoossuse sündroomi sümptomitega. Enamasti avaldub see verejooksu kalduvus sagedase ninaverejooksu, peavalude, üldise halb enesetunne või hägune nägemine ja akustiliste kaebuste korral. Seda tüüpi pahaloomuliste haiguste tuvastamiseks on immunoelektroforees juba pikka aega muutunud standardseks diagnostiliseks protseduuriks.