Aneuploidsuse sõelumine

Aneuploidsuse sõelumine Seda kasutatakse implanteerimiseks mõeldud in vitro loodud embrüote kromosoomaberratsioonide arvuliseks määramiseks. See on tsütogeneetiline uuring, mille käigus saab kindlaks teha ainult teatud kromosoomide arvulised aberratsioonid. Aneuploidsuse sõeluuring on seega implantatsioonieelse diagnoosimise (PGD) vorm.

Mis on aneuploidsuse sõeluuring?

Mõistet aneuploidsuse skriinimine kasutatakse tsütogeneetilise uurimise meetodite kokkuvõtmiseks, mis võivad näidata numbrilisi aberratsioone teatud kromosoomides in vitro viljastamisel (IVF). Põhimõtteliselt võib aneuploidsuse sõeluuring näidata nullosoomiat, monosoomiat ja polüsoomiat, näiteks B. andke trisoomia.

Nullosoomias puudub kromosoomipaar täielikult, monosoomias puudub üks kromosoomipaari homoloogne kromosoom ja polüsoomias on konkreetse kromosoomipaari jaoks rohkem kui kaks homoloogset kromosoomi. Kõige kuulsam polüsoomia on trisoomia 21, mis viib Downi sündroomini. Kuna enamik numbrilisi kromosoomaberratsioone - eriti monosoomiad - on surmavad, st põhjustavad loomulikke katkestusi, raseduse katkemist või surnult sündimist, implanteeritakse emakasse ainult embrüod, millel pole tuvastatavaid kromosoomaberratsioone.

See peaks parandama IVF-i õnnestumise määra, kuid teatud kromosoomaberratsioonid ei ole tingimata surmaga lõppevad, vaid põhjustavad hilisemas elus kõrvalekaldeid ja tõsiseid piiranguid, näiteks Downi või Turneri sündroomi korral. Seetõttu on mõnes riigis eetilistel põhjustel seda tüüpi implantatsioonieelse diagnoosi (PGD) üldine keeld või ranged piirangud.

Funktsioon, mõju ja eesmärgid

Aneuploidsuse sõeluuringut kasutatakse ainult in vitro viljastamiseks. Kõige olulisem eesmärk on embrüote siirdamine emakasse ainult ilma tuvastatavate kromosoomihälvetega, et kunstliku viljastamisega raseduse korral oleks võimalikult suur eduvõimalus. Põhimõtteliselt saab eristada kaht polaarkeha diagnoosimise meetodit ja implantatsioonieelse embrüo uurimist. Esimene meetod hõlmab munaraku polaarkehade uurimist, mida pole veel viljastatud.

Siin kontrollitakse ainult munaraku võimalikku aneuploidsust. Seda tehakse eeldusel, et umbes 90% aneuploidsustest on pärit emalt. Seetõttu ei ole see PGD kitsamas tähenduses, vaid eelistamise diagnoos, kuna viljastamist, s.o munaraku sulamist spermarakuga ei ole toimunud. Implanteerimiseelse embrüo aneuploidsuse sõeluuring varajases blastula staadiumis kvalifitseerub seevastu PGD-ks, kuna uurimine on seotud „tõelise” embrüonaalse staadiumiga - isegi kui see on väga varajases staadiumis, vaid mõni päev vana.

Polaarkeha diagnostikas eemaldatakse kaks polaarset keha, mille munarakk moodustab esimese ja teise meioosi ajal enne selle ühinemist spermarakuga, ja uuritakse aneuploidsust. Võimaliku aneuploidsuse kindlakstegemiseks kasutatakse niinimetatud FISH-testi (fluorestsentsi in situ hübridisatsioon). Siiani on FISH-test võimaldanud uurida ainult kromosoome 13, 16, 18, 21, 22 ning sugukromosoome X ja Y. Meioosi järel lõhestatud kahekordse heeliksi struktuuriga kromosoomid ühenduvad kromosoomspetsiifiliste DNA-sondide abil vastava komplementaarse DNA järjestusega.

DNA-sondid on tähistatud erinevate fluorestsentsvärvidega. Homoloogseid kromosoome saab loendada valguse mikroskoobi all poolautomaatses protsessis, et oleks võimalik tuvastada arvulisi aberratsioone. Sarnaselt polaarse keha diagnoosimisega viiakse aneuploidsuse skriinimine läbi implantatsioonieelsete embrüotega, mis on alles varases blastomeeri staadiumis. Nüüd on aga tegemist kromosoomide diploidsete komplektidega, mille topeltheeliks tuleb kõigepealt jagada, et alustada kromosoomide ühendamist komplementaarsete DNA-sondidega.

Mõlemas meetodis aneuploidsuse sõeluuringu eesmärk on säilitada in vitro viljastatud munarakk enne emakasse viimist positiivse valikuga, et saavutada soovitud raseduse korral võimalikult kõrge edukuse määr. Palju käsitletud eetiline probleem tuleneb negatiivsest valimisest, mis seotakse automaatselt positiivse valikuga ja millele mõned äärmuslikud kriitikud soovivad kasutada argumente, et viia see eutanaasia lähedale. Veel üks eetiline probleem on IVF-i kasutamisel niinimetatud pääste beebi genereerimiseks. In vitro loodud embrüote positiivset valikut saab kasutada kõikvõimsate, immuunsusega ühilduvate tüvirakkude kultiveerimiseks, mis implanteerimise teel päästa teatud haigustega õdede-vendade elu.

Riskid, kõrvaltoimed ja ohud

Nii aneuploidsuse sõeluuring kui ka uuritavate rakutuumade ekstraheerimine toimub väljaspool keha ja seetõttu ei kaasne sellega otseseid terviseohte ega ohtusid ning seetõttu ei esine kõrvaltoimeid. Tegelikud riskid ja ohud seisnevad selles, et blastomeeride, st implantatsioonieelsete embrüote anoiploidsuse sõeluuringute eelis soovitud raseduse õnnestumise suurendamiseks pole veel saavutatud.

Üldiselt tekivad süsteemsed probleemid sõeluuringu tulemuste täpsusega seotud liialdatud ootuste tõttu. See kehtib nii positiivse kui ka negatiivse tulemuse kohta. Positiivne tulemus, s.o vähemalt üks kromosoomaberratsioon leiti, on seotud teatud määramatusega. Võib juhtuda, et positiivne tulemus välistab ekslikult vastava munaraku siirdamise, ehkki tegelikkuses kromosoomipuudust pole. Seda tüüpi väärdiagnoosimine on vähem tingitud protseduurist endast kui asjaolust, et blastula staadiumis embrüodes võib olla mõni kromosoomaberratsiooniga rakk.

Teisest küljest ei tohi IVF-i lapse tulevased vanemad olla kindlad, et kui aneuploidsuse test on negatiivne, siis tegelikult kromosomaalset aberratsiooni ei esine. Teine oht tekib siis, kui embrüost eemaldatakse vajalik arv rakke. Juhtub, et biopsia abil võetud rakud surevad ja neid ei saa enam uurida. Kuna biopsiat ei saa enam samal embrüol korrata, pole see siirdamiseks enam saadaval, kuna testi tulemusi pole. Arutatakse ka selle üle, mil määral mõjutab biopsia embrüo viljakust, nii et see mõjutaks raseduse üldist edukust.